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中华肝脏外科手术学电子杂志

中华肝脏外科手术学电子杂志 ›› 2014, Vol. 03 ›› Issue (01) : 52 -56. doi: 10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2014.01.013

所属专题： 文献；

基础研究

大鼠肝固有动脉阻断肝缺血-再灌注损伤模型最佳灌注时间的研究
林颖1, 刘慧玲1, 王冰2, 曾利娴1, 何卉欣1, 文卓夫1, 汪根树3, 吴斌1,†()   
  1. 1. 510630　广州，中山大学附属第三医院消化内科
    2. 河南省郑州人民医院肝脏外科
    3. 510630　广州，中山大学附属第三医院肝移植中心
  • 收稿日期:2013-12-06 出版日期:2014-02-10
  • 通信作者: 吴斌
  • 基金资助:
    国家重点基础研究发展计划（973）项目(2012CB526700); 国家自然科学基金(30971357, 81170422, 81370511); 广东省自然科学基金(S2011020002348)

Research on the optimum reperfusion duration of liver ischemia-reperfusion injury model by occluding proper hepatic artery in rats

Ying﹡ Lin1, Huiling Liu1, Bing Wang2, Lixian Zeng1, Huixin He1, Zhuofu Wen1, Genshu Wang3, Bin Wu1,†()   

  1. 1. Department of Gastroenterology, the Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510630, China
  • Received:2013-12-06 Published:2014-02-10
  • Corresponding author: Bin Wu
  • About author:
    Corresponding author: Wu Bin, Email:
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引用本文：

林颖, 刘慧玲, 王冰, 曾利娴, 何卉欣, 文卓夫, 汪根树, 吴斌. 大鼠肝固有动脉阻断肝缺血-再灌注损伤模型最佳灌注时间的研究[J]. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2014, 03(01): 52-56.

Ying﹡ Lin, Huiling Liu, Bing Wang, Lixian Zeng, Huixin He, Zhuofu Wen, Genshu Wang, Bin Wu. Research on the optimum reperfusion duration of liver ischemia-reperfusion injury model by occluding proper hepatic artery in rats[J]. Chinese Journal of Hepatic Surgery(Electronic Edition), 2014, 03(01): 52-56.

目的

探讨阻断大鼠肝固有动脉建立肝缺血-再灌注损伤（IRI）模型的最佳灌注时间。

方法

SD大鼠48只，平均体重（200±25）g，按随机数字表法随机分为IRI 0、1、3、6、12、24、48 h组和假手术（SO）组，每组各6只。IRI各组选择性阻断肝固有动脉1 h后血流恢复，分别在血流恢复0、1、3、6、12、24、48 h留取血和肝组织标本。SO组仅分离肝固有动脉，暴露第一肝门1 h后取相应标本。观察各组大鼠血清ALT、AST水平，肝组织病理学改变，肝组织DNA片段化率，肝组织Ki-67表达水平。多组计量资料的比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。

结果

IRI 0、1、3、6、12、24、48 h组和SO组大鼠血清ALT水平分别为（53±25）、（85±20）、（96±18）、（411±96）、（87±19）、（81±15）、（46±6）、（60±14）U/L。大鼠血清AST水平相应为（238±63）、（364±111）、（375±68）、（1 291±511）、（800±87）、（854±218）、（484±219）、（248±94）U/L。IRI 6 h组血清ALT、AST水平最高（F=36.015, 18.241；P<0.05）。IRI 6 h组肝组织损伤程度最重。大鼠肝组织DNA片段化率相应为（7.5±1.5）%、（9.2±2.2）%、（9.3±2.3）%、（12.6±2.4）%、（6.3±1.0）%、（5.4±0.9）%、（4.5±0.8）%、（4.5±1.1）%，6 h组肝组织DNA片段化率最高（F=15.992, P<0.05）。大鼠肝组织Ki-67表达相应为（3.5±1.4）、（5.6±1.8）、（8.7±2.3）、（13.7±2.4）、（15.2±1.2）、（20.5±2.2）、（31.8±2.5）、（2.4±1.2）个/高倍视野，IRI 48 h组肝组织Ki-67表达水平最高（F=261.707，P<0.05）。

结论

阻断大鼠肝固有动脉可以成功建立肝IRI模型，IRI最佳灌注时间为6 h。

关键词: 肝动脉, 再灌注损伤, 模型，动物, 细胞凋亡, 细胞增殖
Objective

To investigate the optimum reperfusion duration of liver ischemia- reperfusion injury (IRI) model by occluding the proper hepatic artery in rats.

Methods

Fourty-eight Sprague Dawley (SD) rats with mean weight of (200±25) g were randomly assigned to 8 groups by random number table method: IRI- 0, 1, 3, 6, 12, 24, 48 h and sham operation (SO) group with 6 rats in each group. The proper hepatic arteries in rats of IRI groups were selectively occluded for 1 h and then blood flow recovered. Samples of blood and liver tissues were collected at the time points of 0, 1, 3, 6, 12, 24, 48 h of reperfusion. In SO group, samples were collected after the proper hepatic artery was isolated and the first portal was exposed for 1 h. The levels of serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), pathological changes, DNA fragmentation rates, and levels of Ki-67 expression of liver tissues were observed in each group. Measurement data of multiple groups were compared using one-way analysis of variance and LSD-t test.

Results

The levels of serum ALT in IRI- 0, 1, 3, 6, 12, 24, 48 h and SO group were (53±25), (85±20), (96±18), (411±96), (87±19), (81±15), (46±6), (60±14) U/L respectively. The levels of serum AST were (238±63), (364±111), (375±68), (1 291±511), (800±87), (854±218), (484±219), (248±94) U/L accordingly. The levels of serum ALT, AST in IRI 6 h group were the highest (F=36.015, 18.241; P<0.05). The damage of liver tissues in IRI 6 h group was the most serious. The DNA fragmentation rates of liver tissues were (7.5±1.5)%, (9.2±2.2)%, (9.3±2.3)%, (12.6±2.4)%, (6.3±1.0)%, (5.4±0.9)%, (4.5±0.8)%, (4.5±1.1)% accordingly, which was the highest in IRI 6 h group (F=15.992, P<0.05). The levels of Ki-67 expression of liver tissues were (3.5±1.4), (5.6±1.8), (8.7±2.3), (13.7±2.4), (15.2±1.2), (20.5±2.2), (31.8±2.5), (2.4±1.2) / high power field accordingly, which was the highest in IRI 48 h group (F=261.707, P<0.05).

Conclusions

The liver IRI model can be successfully established by occluding the proper hepatic artery, and the optimum reperfusion duration of IRI is 6 h.

Key words: Hepatic artery, Reperfusion injury, Models, animal, Apoptosis, Cell proliferation
图1 IRI组大鼠和SO组大鼠肝组织病理学改变（HE ×400）
图2 IRI组大鼠和SO组大鼠肝组织Ki-67表达（免疫组化法×400）
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